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外周血DNA的提取方法
2024-02-27 88人阅读
王欣
心血管内科
副主任医师
北京朝阳医院
外周血DNA的提取方法是使用柱式提取法、酚-氯仿提取法或磁珠提取法。
外周血DNA提取方法的选择主要取决于实验需求、样本量和实验条件等因素。以下是常用的提取方法:
1.柱式提取法:这是一种基于硅胶或树脂柱的提取方法,通过离心将外周血样本进行分离,然后使用蛋白酶K进行细胞溶解,再通过硅胶或树脂柱进行DNA的结合和洗脱。该方法提取的DNA纯度高,适用于小样本和高质量的DNA提取。
2.酚-氯仿提取法:这是一种经典的提取方法,基于物理和化学原理进行DNA的分离和提取。外周血标本中的红细胞通过红细胞裂解液进行裂解,然后经过酚-氯仿提取,将DNA从其他细胞组分中分离得到。该方法简单易行,适用于大样本量的DNA提取。
3.磁珠提取法:这是一种利用表面修饰的磁珠结合靶标DNA,通过磁力进行DNA的分离和提取。外周血样本经过溶解裂解后,添加磁珠进行特异性结合靶标DNA,然后通过磁力作用将磁珠与DNA分离,最后用洗涤缓冲液去除杂质。该方法操作简便,适用于高通量DNA提取。
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